ستون کروماتوگرافی HPLC [ستون اچ پی ال سی + انواع + خرید ستون کروماتوگرافی]

ستون  HPLC

نانوسایز ارائه کننده بهترین مشاوره فنی در زمینه ستون های کروماتوگرافی گاز و مایع ( ستون hplc ) توسط  اساتید و متخصصین تراز اول کشور

پس از سال­ها تلاش و کوشش توانستیم اولین نمونه تجاری ستون­­ های کروماتوگراف مایع با کارایی بالا را درایران تولید کنیم.

فهرست مطالب

• • مشخصات فنی ستون اچ پی ال سی
  • تیم نانوسایز اولین طراح و تولید کننده ستون های کروماتوگرافی مایع (HPLC) در ایران
  • ستون کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
  • ستون کروماتوگرافی مایع فاز نرمال
  • ستون کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا
  • کارکرد
  • کاربرد
  • اصول ستون های HPLC
  • ستونهای پرشده HPLC
  • ستون های پرشده HPLC تبادل یونی
  • نحوه پر کردن
  • انواع ستون کروماتوگرافی موجود در مجموعه نانوسایز
  • انواع ستون C18
  • انواع ستون C8 ساخت گروه نانوسایز
  • سوالات متداول

مشخصات فنی ستون کروماتوگرافی HPLC تولید داخل + خرید ستون کروماتوگرافی

برخی از اطلاعات فنی ستون اچ پی ال سی را در جدول مشاهده کنید.

جهت هرگونه سوال در مورد خرید ستون HPLC، خرید ستون اچ پی ال سی، کروماتوگراف HPLC ایرانی، فروش و قیمت ستون کروماتوگرافی HPLC (ستون اچ پی ال سی) و ” گارد ستون hplc ” با شماره های زیر در تماس باشید.    ۰۹۳۰۷۱۰۹۴۶۹

تیم نانوسایز اولین طراح و تولید کننده ستون های کروماتوگرافی مایع (HPLC) در ایران : (انواع ستون hplc)

انواع ستونهای کروماتوگرافی مایع UHPLC & hplc بر اساس فاز جداسازی شامل : 

1. ستون های کروماتوگرافی مایع فاز معکوس (HPLC Reversed Phase Columns) : ستون های hplc کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
2. ستون کروماتوگرافی مایع فاز نرمال (HPLC Normal Phase Columns) : ستون کروماتوگراف مایع hplc فاز نرمال
3. ستون کروماتوگرافی مایع طرد غربالی (HPLC Size Exclusion Columns) : ستون های کروماتوگرافی مایع اندازه طردی sec.
4. ستون کروماتوگرافی مایع تعویض یونی (HPLC Ion Exchange Columns)
5. ستون کروماتوگرافی مایع آب گریز (HPLC Hydrophobic Interaction Columns)
6. ستون  کروماتوگرافی مایع hplc
7. ستون Affinity کروماتوگراف مایعhplc
8. ستون کروماتوگرافی دستگاه HPLC c18
9. ستون توسو

جهت اطلاع از قیمت ستون hplc c18 با نانوسایز در تماس باشید. 

در ادامه به توضیح هر کدام خواهیم پرداخت.

ستون کروماتوگرافی مایع فاز معکوس (HPLC Reversed Phase Columns)

در ستون کروماتوگرافی مایع فاز معکوس، فاز ساکن یک ماده غیرقطبی مثل اکتادسیل سیلان است که به صورت شیمیایی به ذرات پرکننده متصل می شود. فاز متحرک یک حلال نسبتاً قطبی مثل آب، متانول، استونیتریل، تتراهیدروفوران یا مخلوطی از آنهاست. مخلوطی که باید جداسازی شود، توسط حلال یا مخلوطی از حلال ها (فاز متحرک) به ستون که با فاز ساکن پر شده منتقل می شود.

در شرایط بهینه، اجزایی که باید جداسازی شوند، با سرعت های متفاوت از فاز ساکن عبور کرده و ستون را در زمان های مختلف ترک می کنند. پیک های گونه های خروجی از ستون به کمک یک آشکارساز مشخص می شوند و خروجی که یک کروماتوگرام است رسم می شود.

کاربرد : انواع دارو ها، ویتامین های محلول در چربی ( K ،E ،D ،A )، ویتامین های محلول در آب ( B12 ، B6 ، B5 ، B3 ، B2 ، B1)، آنتی بیوتیک ها، ضد صرع، اسید آمینه، اسید چرب، پپتید، پروتئین، آنزیم، DNA ،RNA، نوکلئوتید، افزودنی های غذایی، افزودنی های پلیمر و …

ستون کروماتوگرافی مایع فاز نرمال(HPLC Normal Phase Columns)

ستونهای فاز نرمال دارای فاز ساکن قطبی بوده و برای آنالیز نمونه های قطبی استفاده می شوند، این ستونها حساسیت های ویژه ای داشته و نیاز به مراقبتهای خاص دارند. علت استفاده از ستونهای فاز نرمال برای نمونه های قطبی اینتراکشن مناسب این نوع فاز ساکن با نمونه های قطبی است. باید توجه داشت معمولا در کار با این نوع ستونها مجاز به استفاده از حلالهای قطبی چون آب، متانول و یا استونیتریل نمی باشیم(مگر در موارد خاص).

نکته در مورد ستون فاز مایع + قیمت ستون hplc c18 + خرید ستون کروماتوگرافی

ضمنا چون غالبا در فازهای متحرک مربوط به کار با این نوع ستونها از حلالهایی چون N-Hexan، دی کلرومتان و یا امثال اینها استفاده می شود. بهتر است قبل از شروع به کار با این حلالها ابتدا به اندازه ۱۰ تا ۲۰ برابر حجم ستون ایزوپروپیل الکل از سیستم عبور داده سپس ستون را با فاز متحرکتان کاندیشن کنید. (این کار مسیر را تا حدودی چرب کرده و مانع از گرفتگی احتمالی مسیر عبور فاز متحرک می گردد. )

در پایان کار با این نوع ستون و قبل از باز کردن آن از روی دستگاه ابتدا باید به اندازه ۵ تا ۱۰ برابر حجم ستون، آنرا با حلال پیشنهادی سازنده در قسمت Storage Condition، شستشو داده و سپس از دستگاه جدا کرده و قسمتهای ورودی و خروجی آنرا با Column End plug محکم ببندید. در صورتی که زمانی طولانی از ستون فاز نرمال استفاده نمی شود، بهتر است حداقل هر ماه یکبار آنرا به اندازه ۱۰ تا ۲۰ برابر حجم ستون با حلال پیشنهادی سازنده در قسمت Storage Condition شستشو دهید تا فاز ساکن آن خشک نشود.

قیمت hplc را از نانوسایز بپرسید. 

کاربرد و موارد استفاده ستون تولیدی ما

قندها، اولیگو ساکاریدها، دارو ها، داروهای قطبی، گلیکان ها، ویتامین های محلول در آب، داروهای شیمی درمانی و …

ستون کروماتوگرافی مایع فاز با کارایی بالا

ستون کروماتوگرافی مایع با عملکرد بالا (به انگلیسی : High performance liquid Chromatography)، که با عنوان کروماتوگرافی مایع با فشار بالا (High pressure liquid chromatography) مشهور و شناخته شده است. یکی از متداول ترین و مهم ترین روش های کروماتوگرافی است، که کاربرد فراوانی در تحقیقات و  صنعتهایی مختلف همچون آرایشی، دارویی، غذایی و… دارد.

کروماتوگرافی بالا با کارایی بالا ((High-performance liquid chromatography، نوعی سوانگاری (کروماتوگرافی) مایع مبی باشدکه در آن فاز مایع به آسانی تغییر می کند. و بر زمان تجزیه و قدرت تفکیک تاثیر گذار است.

کروماتوگرافی مایع کارا در پمپ های متکی به عبور یک حلال مایع تحت فشار، که حاوی مخلوط نمونه است. ستون با با ماده جاذب جامد پر شده است. برخورد هر عنصر در نمونه موجب افزایش سرعت می شود. و موجب جدایی اجزای آن ها به صورت جریان از ستون می شود.

نتایج حاصل حاکی از آن است که با کاهش اندازه ذرات فاز ساکن، کارایی ستون افزایش می یابد. با کم شدن ذرات فاز ساکن، قابلیت نفوذ کم می شود. برای این که حلال جریان داشته باشد، باید فشار وجود داشته باشد. کاهش قطر ذرات بین ۱۰-۳ میکرومتر و توسعه انواع پمپ ها موجب تامین فشار بالاتر و سرعت جریان یکنواخت و پایدار می شود.

خرید ستون hplc را به ما بسپارید. 

نحوه عملکرد ستون کروماتوگرافی + قیمت ستون hplc c18

در کروماتوگرافی مایع، فاز متحرک مایع است و فاز ثابت ممکن است مایع یا جامد باشد. نمونه ابتدا در یک حلال حل شده و سپس وارد ستون می‌شود. تحت فشار بالا جریان می‌یابد. انواع مختلفی از برهم کنش‌ها و نیروهای مولکولی در فرایند بازداری مؤثر هستند. کروماتوگرافی مایع براساس نیروهای مؤثر و در نتیجه مکانیسم جداسازی و نوع فاز ساکن به انواع : کروماتوگرافی تقسیمی(Partition chromatography)، کروماتوگرافی جذب سطحی(Adsorption chromatography)، کروماتوگرافی تعویض یونی(Ion-exchange chromatography)، کروماتوگرافی اندازه-طردی(Size-exclusion chromatography)، کروماتوگرافی کایرال(Chiral chromatography) و کروماتوگرافی افینیته(Affinity chromatography) تقسیم می‌شود.

کروماتوگرافی تقسیمی کاربرد بیشتری از انواع دیگر دارد. جداسازی حل شونده‌ها بر مبنای قابلیت متفاوتشان در تقسیم بین فاز متحرک و ساکن استوار است.

کارکرد ستون های کروماتوگرافی

مخلوط نمونه به منظور جداسازی و آنالیز، در حجم کم گسسته (معمولاً میکرولیتر)، به جریان فاز متحرک که از طریق ستون عبور می کند وارد می شود. اجزای نمونه با سرعت های مختلف از  طریق ستون حرکت می کنند. (که به آن فاز ساکن نیز گفته می شود). سرعت هر مولفه به ماهیت شیمیایی، ماهیت فاز ساکن (ستون) و به ترکیب فاز متحرک بستگی دارد.

انواع مختلفی از ستون ها در دسترس است که با جاذب های مختلف در اندازه ذرات و از نظر ماهیت سطح آنها پر شده است (“شیمی سطح”). استفاده از مواد بسته بندی اندازه ذرات کوچکتر نیاز به استفاده از فشار عملیاتی بالاتر (“فشار برگشتی”) دارد. به طور معمول وضوح کروماتوگرافی (درجه تفکیک پیک بین آنالیت های متوالی خارج شده از ستون) را بهبود می بخشد.

ذرات جاذب ممکن است ماهیت آبگریز یا قطبی داشته باشند. فازهای متحرک متداول مورد استفاده هر ترکیب، شامل مخلوط آب با حلال های آلی مختلف (متداول ترین آنها استونیتریل و متانول) است. برخی از روش های HPLC، از فاز متحرک بدون آب استفاده می کنند. ترکیبات آبی فاز متحرک شامل اسید (مانند اسید فرمیک، فسفریک یا تری فلوئوراستیک) است. به جداسازی اجزای نمونه کمک می کند.

انتخاب ترکیب فاز متحرک به اجزا مختلف نمونه (آنالیت) و فاز ثابت وابسته است. بسته به میل آنها برای فازهای ثابت و متحرک، در طول فرآیند جداسازی در ستون، آنالیز فازهای ثابت و متحرک را انجام می دهند.

  قیمت ستون gc را از کارشناسان ما بخواهید. 

 کاربرد ستون های کروماتوگرافی

در این قسمت به توضیح انواع ستون ها پرداخته شده است.

تولید و ساخت

HPLC، کاربرد زیادی در علوم آزمایشگاهی و بالینی دارد. ستون اچ پی ال سی، یک روش معمول و کارآمد در صنعت داروسازی است. زیرا، محصول با درصد خلوص بالا را ارائه می دهد. اچ پی ال سی، محصولات خالص تولید می کند. اما همیشه روش اصلی مورد استفاده در تولید مواد دارویی فله ای نیست. طبق فارماکوپه اروپا، HPLC فقط در ۱۵٫۵٪ از سنتزها کاربرد دارد.

با این حال طبق بیانات فارماکوپه ایالات متحده، اچ پی ال سی در ۴۴% از سنتز ها نقش بسزایی دارد. با این حال، این ماده در ۴۴٪ از سنتزها در فارماکوپه ایالات متحده نقش دارد. علت این امر تفاوت در محدودیت پولی و زمانی است. زیرا  HPLC در مقیاس بزرگ می تواند یک روش گران قیمت باشد.

افزایش در ویژگی، دقت و صحت که با HPLC اتفاق می افتد متاسفانه با افزایش هزینه مطابقت دارد. خرید ستون کروماتوگرافی را به نانوسایز بسپارید.

پژوهش

این روش بدیهی است که در مشاهده گونه های مختلف در نمونه های جمع آوری شده نیز مفید است. اما هنگام جستجوی اطلاعات در مورد هویت گونه ها، نیاز به استفاده از راه حل های استاندارد است. این به عنوان روشی برای تأیید نتایج واکنشهای سنتز استفاده می شود. زیرا درصد خلوص در این نوع تحقیقات ضروری است. با این حال، طیف سنجی جرمی همچنان روش مطمئن تری برای شناسایی گونه ها است.

پزشکی

استفاده پزشکی از HPLC می تواند شامل تجزیه و تحلیل دارو باشد. اما بیشتر در گروه تجزیه و تحلیل مواد مغذی قرار می گیرد. در حالی که ادرار متداول ترین ماده برای تجزیه و تحلیل غلظت دارو است. سرم خون نمونه ای است که برای اکثر آنالیزهای پزشکی با HPLC جمع آوری شده است.

روشهای دیگر تشخیص مولکولها که برای مطالعات بالینی مفید هستند. در برابر اچ پی ال سی آزمایش شده اند. در یک مثال از این، سنجش های اتصال پروتئین (CPBA) و HPLC برای حساسیت در تشخیص ویتامین D مقایسه شد. برای تشخیص کمبود ویتامین D در کودکان مفید است، مشخص شد که حساسیت و ویژگی این CPBA به ترتیب فقط ۴۰ و ۶۰ درصد ظرفیت HPLC است. در حالی که ابزاری گران قیمت است، دقت HPLC (ستون اچ پی ال سی) تقریباً بی نظیر است.

خرید ستون کروماتوگرافی و قیمت دستگاه hplc را به ما بسپارید. 

اصول ستون های HPLC

خصوصیات فیزیکی مولکولهای هدف (آنالیتها) انتخاب مناسب ترین ستون HPLC را برای یک جداسازی تعیین می کند. خصوصیات مولکولی که بر انتخاب ستون HPLC تأثیر می گذارد. شامل آبگریزی – آب دوستی، نیروهای بین مولکولی (به ویژه دو قطبی-دو قطبی)، نیروهای درون مولکولی (یونی) و اندازه مولکول می باشد. جداسازی ستون HPLC اغلب می تواند از اختلافات متعدد در خصوصیات مولکولی، مولکولهای هدف استفاده کند.

به طور کلی، ساختار و شیمی ستون پرکننده HPLC (فاز ساکن) مشخصات شستشوی آنالیت را تعیین می کند. اندازه ستون های HPLC از کپیلاری تا مقیاس فرآیند متغیر است. قطر داخلی (ID) و حجم یک ستون هم میزان بارگیری نمونه بر روی ستون را و هم میزان حساسیت جداسازی را تعیین می کند.

ID ستون می تواند بر مشخصات جداسازی تأثیر بگذارد، به ویژه هنگام استفاده از شستشوی شیب دار، ID کوچکتر که باعث افزایش جداسازی و حساسیت تشخیص می شود. بنابراین، برای جداسازی های تجزیه ای معمولا بین حساسیت و حجم نمونه بارگذاری شده روی یک ستون یک معاوضه وجود دارد.

ستونهای پرشده HPLC + ستون c18 و c8

بسیاری از انواع مواد پرشده مورد استفاده برای کروماتوگرافی گرادیانی یا فشار کم، قادر به تحمل فشارهای زیاد مورد استفاده در سیستم HPLC نیستند. متداولترین مواد پرشده که در ستون های HPLC که استفاده می شود. شامل سیلیس یا هیدروکسی آپاتیت و رزین های پلیمری مانند پلی استایرن دی وینیل بنزن است. استفاده از حلقه های با قطر کوچکتر به دلیل افزایش سطح باعث افزایش حساسیت جداسازی می شود. با این وجود، با کاهش قطر حلقه برای دبی مشخص، فشار ستون افزایش می یابد و یک حد پایین تر برای اندازه حلقه ایجاد می کند.

قطر حلقه های میانی برای یک ستون تجزیه ای HPLC معمولا در محدوده ۱٫۸-۵ میکرومتر قرار دارند. ستون های اولیه HPLC با ذرات سیلیکا به شکل نامنظم پر می شدند تا سطح آنها افزایش یابد. در حال حاضر ، سیلیکا متخلخل کروی برای اکثر موارد جایگزین سیلیکای نامنظم می شود. شکل کروی باعث افزایش کارایی و فشار کمتری می شود و تخلخل باعث افزایش سطح می شود. رزین های پلیمری دارای پیوند های عرضی بسیار هستند. به ویژه برای جداسازی در مواردی که pH خارج از محدوده عملیاتی پرکننده ای سیلیکا می باشد بسیار مفید است.

قیمت ستون hplc c18 را از ما جویا شوید. 

ستون های پرشده HPLC تبادل یونی

یک ستون تبادل یونی می تواند کاتیونی یا آنیونی باشد. این نوع ستون اچ پی ال سی مولکول های قطبی را بر اساس بار آنها جدا می کند. فاز متحرک مورد استفاده بافر آبی هستش. ستون های HPLC تبادل یونی می توانند برای جداسازی انواع مختلف آنالیت ها مورد استفاده قرار گیرند. معمولا برای جداسازی کربوهیدرات ها، اسیدهای آمینه و پروتئین ها استفاده می شوند.

کروماتوگرافی تبادل یونی و تبادل لیگاند ممکن است در یک ستون ترکیب شود. در ستون های حالت ترکیبی، تبادل یونی معمولا از طریق یون های فلزی انجام می شود. لیگاند ها از طریق مولکول های دهنده الکترون مانند گروه های هیدروکسیل یا آمین ها تبادل می کنند. این نوع ستون HPLC اغلب برای جداسازی مونوساکاریدها استفاده می شود.

ستون های HPLC فاز معکوس + ستون c18

ستون های HPLC فاز معکوس ذرات پرکننده غیر قطبی دارند. برای آنها از فازهای متحرک حلال آلی آبی و محلول در آب استفاده می شوند. متداول ترین حلال ها استونیتریل، متانول و تتراهیدروفوران (THE) هستند. در ستونهای فاز معکوس از شستشوی ایزوکراتیک (غلظت ثابت) و شیب (افزایش غلظت حلال آلی) استفاده می شود. انتخاب زمان و ماندگاری به تعدادی از پارامترها از جمله PH فاز متحرک بستگی دارد.

ستون اچ پی ال سی فاز معکوس متنوع ترین نوع ستونی است که معمولا مورد استفاده قرار می گیرد. می تواند برای طیف گسترده ای از انواع مختلف آنالیت استفاده شود.

ستون های HPLC فاز نرمال

این دسته از ستون ها، مواد پرکننده قطبی هستند. فاز متحرک غیر قطبی است. بنابراین معمولا یک حلال آلی مانند هگزان یا متیلن کلراید است. این نوع ستون HPLC شامل نوعی کروماتوگرافی پارتیشن با استفاده از کروماتوگرافی مایع برهمکنش آبدوست (HILC) است که در آن فاز متحرک حاوی غلظت کمی آب است.

در یک ستون پارتیشن بندی شده یونی، افزودن ترکیبات یونی مانند استات آمونیوم به فاز متحرک می تواند هم زمان ماندن آنالیت ها را تغییر دهد و هم قطبیت آنها را افزایش دهد. این کلاس از ستون HPLC برای مولکول های کوچک مانند اسیدهای آلی، برخی داروها و طیف وسیعی از مولکول های زیستی از جمله پروتئین های گلیکوزیله استفاده می شود.

پرکننده ستون اچ پی ال سی فاز نرمال 

سایز X ستون های HPLC به تعامل آنالیت ها با مواد پرکننده ستون متکی نیست. بلکه از یک اثر الک بر اساس وزن مولکولی استفاده می کنند. پرکننده ها شامل هر دو مزوپور و میکروپور است. توزیع اندازه منافذ، اندازی مولکولهای نمونه را تعیین می کند که می توانند در منافذ پخش شوند. میزان نفوذ مولکول های به درون منافذ زمان ماندگاری و مشخصات شستشو را تعیین می کند.

مولکولهایی که برای ورود به منافذ بیش از حد بزرگ هستند، از ستون به سرعت عبور می کنند و بعد از حجم خالی به عنوان یک تک پیک نمایان می شود. سایز X ستون های HPLC در درجه اول برای جداسازی پروتئین ها و کربوهیدرات ها استفاده می شود.

انواع دیگر ستون های HPLC شامل ستون های پیوسته، حذف یون و کروماتوگرافی جابجایی است. از یک ستون Chiral HPLC می توان برای رفع مخلوط راسمیک استفاده کرد.

نحوه پر کردن ستون hplc ایرانی + احیا ستون C18 و شست و شوی آن 

مراحل پر کردن ستون hplc را در زیر مشاهده می کنید.

• شست و شوی کامل ستون جهت رفع آلودگی براساس دستورالعمل سازنده
• شست و شوی اختصاصی برای رفع آلودگی های باقیمانده که با دستور العمل سازنده همچنان در ستون بوده و رفع نشد با استفاده از متد ویژه 
• تزریق مواد به پکینگ ستون جهت جایگزینی و ترمیم پکینگ از دست رفته با استفاده از متود ویژه 

ستون کروماتوگرافی موجود در مجموعه نانوسایز

• ستون C18
• ستون C8

در ادامه به توضیح آن خواهیم پرداخت.

انواع ستون کروماتوگرافی C18

• انواع آن عبارتند از : ستون HECTOR-M C18 (ستون hplc  ساخت آمریکا) – ستون hplc  تولید داخل – ستون اچ پی ال سی زیمنس – ستون اچ پی ال سی دلتا – ستون توسو

ستون C8 ساخت گروه نانوسایز – مشخصات ستون c18

ستون های کروماتوگرافی موجود در مرکز نانوسایز در جدول زیر ارائه می شود.

قیمت ستون اچ پی ال سی ایرانی (قیمت ستون hplc c18) -قیمت ستون کروماتوگرافی

جهت اطلاع از قیمت ستون hplc c18 با کارشناسان فروش ما در تماس باشید. 

سوالات متداول