ستون کروماتوگرافی HPLC با کیفیت درجه یک تولید ایران

ستون HPLC

ستون HPLC یکی از مهمترین اجزای دستگاه کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا است و انتخاب صحیح آن تأثیر مستقیمی بر کیفیت جداسازی، سرعت تحلیل، دقت نتایج و پایداری دستگاه دارد. به همین دلیل، انتخاب ستون مناسب برای هر نوع نمونه، یکی از حساس‌ترین بخش‌های فرآیند آزمایشگاهی است. در این صفحه تلاش کرده‌ ایم تمام اطلاعات لازم درباره انواع ستون کروماتوگرافی HPLC، کاربردها، روش انتخاب، مشخصات فنی، نکات نگهداری و همچنین مزیت خرید از مجموعه نانوسایز را به‌صورت کاملاً تخصصی و قابل استفاده ارائه کنیم.

اما تفاوتی که این مقاله را ارزشمند می‌ کند این است که ما نه‌ تنها تأمین‌ کننده، بلکه تولیدکننده مستقیم ستون HPLC هستیم. بنابراین اطلاعاتی که در ادامه مطالعه می کنید کاملاً عملی، فنی و مبتنی بر تجربه مهندسی فرآیند تولید ستون است.

ستون HPLC چیست و چگونه کار می‌کند؟

ستون HPLC یک لوله باریک از جنس فولاد ضدزنگ (Stainless Steel) یا گاهی PEEK است که درون آن با ذرات ریز فاز ساکن (Stationary Phase) پر شده است. این ستون محل اصلی جداسازی اجزای مخلوط است. در حقیقت، تمامی کیفیت عملیات کروماتوگرافی درون ستون اتفاق می‌ افتد و به همین دلیل است که انتخاب ستون مناسب اهمیت بسیار زیادی دارد.

بیایید کار را با یک تشبیه ساده شروع کنیم. تصور کنید یک مسابقه دو امدادی را در یک زمین پر از موانع مختلف. دونده‌ های سریع (اجزای کم جذب‌ شونده) راحتتر از موانع عبور می‌ کنند و زودتر به خط پایان می‌ رسند، در حالی که دونده‌ های کندتر (اجزای با جذب بالا) بیشتر درگیر موانع شده و دیرتر به نقطه پایان می رسند.

ستون HPLC دقیقاً چنین نقشه را اجرا می‌ کند :

• ستون : همان مسیر مسابقه است که معمولاً از فولاد ضدزنگ ساخته می‌ شود تا فشار بالا را تحمل کند.
• فاز ساکن : همان موانع مسیر است که به صورت ذرات ریز (معمولاً ۳ تا ۵ میکرومتر) در داخل ستون پرشده است.
• فاز متحرک : حلالی است که تحت فشار بالا، نمونه را در ستون به حرکت در می‌ آورد.

تعامل بین هر جزء از نمونه با فاز ساکن، سرعت حرکت متفاوتی برای آن‌ها ایجاد می‌ کند و در نهایت، اجزای آن در زمانهای مختلف از ستون خارج شده و جداسازی انجام می‌ شود.

انواع ستون‌ های HPLC و کاربرد آن‌

انتخاب نوع ستون، بسته به ماهیت نمونه و هدف آنالیز شما، تعیین‌ کننده است. در ادامه به بررسی متداولترین انواع می‌ پردازیم.

1. فاز معکوس
2. فاز نرمال
3. تبادل یونی
4. طرد اندازه

ستون فاز معکوس (Reversed Phase) – پرکاربردترین نوع – پرفروش‌ ترین و همه‌کاره‌ ترین نوع

این ستون‌، محبوبترین و پرمصرف‌ ترین نوع در بسیاری از آزمایشگاه‌ ها هستند. در این سیستم، فاز ساکن غیرقطبی و فاز متحرک قطبی است.

ستون HPLC C18 (ODS):  سلطان بی‌رقبای دنیای ستون‌های کروماتوگرافی. این ستون دارای گروه های اکتادسیل سیلان (غیرقطبی) است و برای جداسازی طیف وسیعی از ترکیبات با حلالیت در آب و حلال‌های آلی-آبی استفاده می‌شود.
ستون C8: مشابه C18 اما با زنجیره کوتاه‌ تر. برای مولکولهای بزرگتر مانند پپتیدها مناسب‌تر است.
ستون CN (سیانو): دارای قطبیت متوسط و کاربری چند منظوره.

💡 نکته کاربردی نانوسایز
بیش از ۸۰ درصد آنالیزهای روتین آزمایشگاهی با ستون فاز معکوس و به‌طور خاص با ستون C18 انجام می‌ پذیرد. اگر در انتخاب مردد هستید، این گزینه ایمنترین انتخاب برای شروع است.

 ستون فاز نرمال (Normal Phase)

در این ستون‌، شرایط برعکس است : فاز ساکن قطبی (مانند سیلیکاژل) و فاز متحرک غیرقطبی (مانند هگزان یا کلروفرم) است. این ستون‌ به منظور جداسازی ترکیبات بسیار قطبی مانند ایزومرها و برخی قندها استفاده می‌ شود.

 ستون تبادل یونی (Ion Exchange)

اینجا جداسازی بر اساس بار مولکول‌ها انجام می‌ شود. فاز ساکن دارای گروه‌ های دارای بار مثبت یا منفی است و مولکول‌ های نمونه بر اساس بار مخالف خود به آن متصل می‌ شوند. برای جداسازی اسیدهای آمینه، نوکلئوتیدها و پروتئین‌ ها ایده‌ آل است.

ستون طرد اندازه (Size Exclusion)

این ستون‌ مانند یک الک مولکولی عمل می‌ کنند. مولکولهای بزرگتر که نمی‌ توانند به حفره‌ های فاز ساکن نفوذ کنند، سریعتر از ستون خارج می‌ شوند و مولکول‌ های کوچکتر که وارد حفره‌ ها می‌ شوند، دیرتر خارج می‌ گردند. برای تعیین وزن مولکولی پلیمرها و پروتئینها کاربرد دارد.

کاربردهای ستون HPLC

ستونهای HPLC بسته به نوع فاز ساکن و اندازه ذرات، در حوزه‌های مختلف استفاده می‌ شوند.

• صنایع دارویی و کنترل کیفیت
• آزمایشگاه‌ های بیوشیمی و زیست‌ فناوری
•  صنایع غذایی
•  پتروشیمی و پلیمر
• محیط‌ زیست و آنالیز آلاینده‌ ها
• آزمایشگاه‌ های تحقیقاتی دانشگاهی

نحوه پر کردن ستون hplc ایرانی + احیا ستون C18 و شست و شوی آن 

مراحل پر کردن ستون hplc را در زیر مشاهده می کنید.

• شست و شوی کامل ستون جهت رفع آلودگی براساس دستورالعمل سازنده
• تزریق مواد به پکینگ ستون جهت جایگزینی و ترمیم پکینگ از دست رفته با استفاده از روش ویژه و مخصوص گروه نانوسایز 

شستشوی ستون HPLC در نانوسایز؛ چگونه طول عمر آن را چند برابر کنیم؟

نگهداری و شستشوی ستون HPLC صحیح، کلید حفظ کارایی و افزایش طول عمر آن است. یک ستون به‌درستی نگهداری شده، می‌تواند برای صدها بار آنالیز نتیجه قابل اطمینانی ارائه دهد. البته استفاده از گارد نیز طول عمر ستون را افزایش می دهد.

• شستشوی معمولی (Routine Cleaning) (شروع با حلال ضعیف‌تر –  افزایش تدریجی ACN یا MeOH – پایان با تعادل‌دهی (Equilibration))
• شستشوی عمیق (Deep Washing) برای C18 ( استفاده از ایزوپروپانول – شستشو با آب دیونیزه – جلوگیری از تغییر ناگهانی pH)

نکته حیاتی برای افزایش عمر ستون : هرگز ستون C18 را طولانی‌ مدت در فاز کاملاً آبی نگه ندارید. این کار باعث شسته شدن فاز ساکن و کاهش کارایی می‌ شود.

نکات طلایی برای شستشو و نگهداری

• هرگز ستون را با آب خالص رها نکنید! این کار باعث رسوب نمک و گرفتگی شدید ستون می‌ شود.
• از تغییرات ناگهانی در ترکیب فاز متحرک خودداری کنید. تغییرات باید به آرامی و به صورت گرادیان انجام شود.
• همیشه از حلال‌ های با خلوص HPLC استفاده کنید.
• نمونه‌ ها را حتماً فیلتر کنید (با فیلترهای ۰.۲۲ یا ۰.۴۵ میکرون).

میزان نرمال HPLC چیست؟

این اصطلاح معمولاً به “حجم تزریق نرمال” یا “شرایط آنالیز نرمال” اشاره دارد. این مقدار بستگی به ابعاد ستون و روش دارد و باید در روش استاندارد یا مقالات معتبر جستجو شود. به‌طور کلی، برای یک ستون استاندارد ۴.۶×۱۵۰ میلیمتر، حجم تزریق ۱۰-۲۰ میکرولیتر می‌ تواند “نرمال” در نظر گرفته شود. البته منظور از “میزان نرمال HPLC” شرایط استاندارد عملکرد ستون است.

• فشار یکنواخت و بدون نوسان
• پیک‌ متقارن ( این مطلب را بخوانید علت پیک های پهن در HPLC   )
• رزولوشن مناسب
• زمان بازداری ثابت
• نبودن Tail و Broadening

اگر هرکدام از موارد بالا مختل شود، معمولاً ستون نیازمند شستشو یا تعویض است.

چرا انتخاب ستون HPLC مهم است؟

کارایی یک ستون به سه عامل وابسته است:

• کیفیت سیلیکا و یکنواختی ذرات
• ثبات شیمیایی فاز ساکن (به‌ خصوص در C18)
• فرایند بسته‌ بندی ستون (Packing Technology)

بعنوان تولیدکننده، ما این سه مورد را به‌طور کامل کنترل می‌ کنیم و همین باعث شده ستون‌ های HPLC داخلی با کیفیت رقابتی در برابر برندهای خارجی عرضه شوند.

چرا ستون C18 تولید داخل ارزش خرید دارد؟ 

تولید داخلی به علت موارد زیر اهمیت دارد.

• قیمت رقابتی
• کیفیت قابل مقایسه با برندهای خارجی
•  امکان تست قبل از خرید
• خدمات گارانتی و تعویض

خریداران حرفه‌ ای آزمایشگاهی می‌ دانند که مهم‌ ترین عامل در انتخاب ستون، پایداری روش در درازمدت است و ستون‌ های داخلی با کنترل QC سختگیرانه این نیاز را پوشش می‌ دهند.

قیمت خرید ستون hplc

اگر به دنبال خرید ستون HPLC، خرید ستون کروماتوگرافی و اطلاع از قیمت ستون HPLC C18 هستید، خرید مستقیم از تولیدکننده بهترین انتخاب است. ما با ارائه کیفیت تضمین‌ شده، تست‌ های فنی و پشتیبانی کامل، مناسب‌ ترین گزینه را برای آزمایشگاه شما فراهم می‌ کنیم.

برای دریافت مشاوره تخصصی، استعلام قیمت یا ثبت سفارش تولید سفارشی، همین حالا با کارشناسان ما تماس بگیرید. 📞 تماس مستقیم: ۰۹۳۰۷۱۰۹۴۶۹

سؤالات پرتکرار (FAQ )

قیمت ستون HPLC C18 چقدر است؟

متناسب با سایز، نوع فاز و اندازه ذرات متغیر است. برای استعلام قیمت دقیق، با ما تماس بگیرید.

آیا می‌توان ستون داخلی را جایگزین برند خارجی کرد؟

بله؛ بسیاری از مشتریان صنعتی ما ستونهای داخلی را با موفقیت جایگزین برندهای خارجی کرده‌ اند.

ستون HPLC جدید را قبل از استفاده چگونه conditioning کنم؟

دستورالعمل سازنده اولویت دارد. اما به‌طور کلی، برای ستون فاز معکوس جدید، ابتدا با دبی پایین (مثلاً ۰.۲ میلی‌لیتر بر دقیقه) آن را با حلال انتهایی (مثلاً متانول ۱۰۰٪) به مدت ۳۰ دقیقه شستشو داده، سپس به آرامی به ترکیب حلال مورد نظر روش آنالیز خود برسید.